Напишите нам

Установление отцовства (родства) по анализу ДНК.

Анализ ДНК как правило проводится с целью установления отцовства или материнства и позволяет определять биологическое родство между ребенком и предполагаемым отцом или матерью. Чаще всего ДНК тест заказывают мужчины, желающие убедиться в своем отцовстве. Очень часто важным моментом становится возможность провести тест анонимно, не ставя в известность о своих подозрениях мать ребенка.

Стандартный тест ДНК на отцовство (материнство) проводится при участии ребенка и предполагаемого отца (матери).

Как производится забор образцов биоматериала для анализа ДНК.

Современные научные технологии позволили максимально упростить процедуру получения биологического материала для ДНК исследований. До последнего времени для анализа на определение отцовства чаще всего использовалась кровь, что доставляло значительные неудобства. Сейчас анализ ДНК на отцовство проводится по слюне, волосам, ногтям и т.д. Стандартный анализ проводится по образцам, собранным с помощью стерильных зондов с обратной стороны щеки. Процедура совершенно безболезненна и занимает всего несколько минут.

Как проводится анализ ДНК по установлению отцовства.

Как только лаборатория получила Ваши образцы, в абсолютно стерильных условиях выделяется ДНК из ротовых мазков и подвергается процессу, называемому полимеразно-цепная реакция (ПЦР). При помощи ПЦР можно протестировать сотни генов даже в самом маленьком образце ДНК. По окончании реакции её продукты анализируются на самом современном на сегодняшний день ДНК-сиквенаторе, где мельчайшие различия между образцами будут детектированы со 100% вероятностью.

Полученные данные затем вводятся в специальную программу для расчета генетического родства по результатам анализа ДНК. Эта программа высчитывает вероятность того, что данный образец ДНК является родственным по отношению к контрольному образцу (контрольным образцом служит образец ДНК ребёнка при установлении отцовства, или материнства, а при установлении близкого родства им служит образец ДНК предположительного родственника).

Установление отцовства по ДНК проводится методом анализа 16, 20 или 24 STR генетических маркеров, являющихся стандартными маркерами для анализа ДНК на определение отцовства во всех ведущих лабораториях мира. Каждое заключение о результатах анализа подписывается заведующим лаборатории, имеющим сертификат генетика и судмедэскперта. Гарантированная точность при установлении отцовства по ДНК с вероятностью не менее 99,9999%. Этот показатель на несколько порядков превышает показатели, при которых Российским судом выносится определение «отцовство практически доказано». Точность при опровержении составляет 100% (точность 100% при подтверждении теоретически недостижима).

ДНК АНАЛИЗ С ЦЕЛЬЮ УСТАНОВЛЕНИЯ РОДСТВАM

Принципы генетического анализа:

Генетический анализ основан на исследовании небольших участков ДНК генома человека, которые называются «ДНК маркеры» или «локусы». Каждый из этих локусов имеет ряд вариантов, называемых «аллельные варианты», или просто, «аллели». Некоторые локусы имеют 7-8 аллелей, некоторые 20 и более. Частоты встречаемости аллелей отличаются между расовыми группами и даже между популяциями одной и той же расовой группы.

Комбинация аллелей по всем проанализированным локусам называется ДНК профиль человека. Современные методы ДНК экспертизы позволяют одновременно анализировать геном человека по большому количеству локусов. Сегодня стандартный анализ включает в себя исследование ДНК по 16 маркерам, но ведущие мировые лаборатории, включая Медикал Геномикс, уже используют 20 и даже большее количество локусов. Для получения результатов современные лаборатории применяют автоматизированные генетические анализаторы, которые определяют, какие аллели присутствуют в исследуемом образце ДНК, и выдают результат в виде электрофореграммы, где указаны локусы и аллельные пики. В Медикал Геномикс используется автоматизированный генетический анализатор последнего поколения Applied Biosystems 3500, который производится компанией Life Technologies (США). Этот анализатор является стандартным типом оборудования в лучших криминалистических лабораториях мира

После получения ДНК профилей всех участников анализа генетические данные подвергаются статистической обработке, на основании которой делается вывод о вероятности интересующей степени родства. В зависимости от типа исследуемого родства статистическая программа сравнивает наличие общих аллельных вариантов по каждому из изученных локусов между участниками анализа и рассчитывает индекс родства. Расчеты индекса и вероятности родства в Медикал Геномикс проводят на основе аллельных частот, полученных для населения Российской Федерации. Статистическая обработка данных осуществляется при помощи специального программного пакета, разработанного сотрудниками Медикал Геномикс.

Генетическая экспертиза может проводиться как на биологическом образце человека (например, ротовой мазок, кровь, волосы), так и на небиологическом образце, который был в контакте с человеком и на котором остались его биологические следы (зубная щётка, предметы одежды, бритва, соска, предметы кухонной утвари). Все эти объекты могут быть предоставлены в лабораторию Медикал Геномикс для анализа.

Современные методы ДНК экспертизы высокочувствительны и не требуют большого количества ДНК. В качестве основного биологического образца для анализа в нашей лаборатории используются ротовые мазки (клетки внутренней поверхности щеки - буккальный эпителий). Ротовые мазки является самым распространенным в мире типом образца при проведении ДНК экспертизы. Согласно последним исследованиям генетических лабораторий в разных странах, в более чем 99% случаев анализы ДНК с целью установления родства проводятся по ротовым мазкам. Следует понимать, что так, как все клетки человека, вне зависимости от типа ткани, имеют одинаковую ДНК, то при проведении генетической экспертизы можно сравнивать образцы ДНК полученные ротовым мазком, с образцом крови или даже с ДНК, выделенной из окурка, зубной щётки или же предмета одежды.

Процедура проведения ДНК анализов в Медикал Геномикс:

Поступающие в лабораторию Медикал Геномикс образцы проходят первичную регистрацию и заносятся в специально созданную базу данных. База данных автоматически присваивает каждому образцу уникальный номер, что позволяет не только вести учет образцов, но и идентифицировать и установить местонахождение образца ДНК через многие месяцы после анализа. При необходимости лаборант может определить статус любого анализа, когда были получены образцы и какого они типа и другую информацию, необходимую для работы. Конверты с образцами, почтовые накладные и все сопроводительные документы сканируются и так же заносятся в базу данных.

По окончании первичной регистрации, конверты с образцы попадают в выделительную лабораторию, где они вскрываются, и ДНК выделяется из образцов. После выделения ДНК сотрудники лаборанты оценивают ее количество и качество.

Выделенная ДНК затем попадает в лабораторию для проведения полимеразной цепной реакции (ПЦР). Небольшое количество ДНК добавляется в реакционную смесь, содержащую реагенты для анализа генетических маркеров, после чего реакционная смесь помещается в ДНК амплификатор для проведения ПЦР. После проведения ПЦР продукты реакции помещаются в автоматизированный капиллярный генетический анализатор последнего поколения, который выдает ДНК профили всех проанализированных образцов. Для генотипирования мы применяем оборудование и наборы реагентов, сертифицированные Министерством Здравоохранения Российской Федерации для проведения судебно-генетических экспертиз.

Полученные в автоматическом режиме ДНК профили проверяются сотрудниками лаборатории и затем подвергаются био-статистической обработке. Для расчета индексов и вероятности родства мы используем базу данных генетических частот аллелей, полученных нами для населения Российской Федерации. Результаты этих анализов были опубликованы в международном генетическом журнале. Применение российской базы данных аллельных частот является необходимым для точного определения генетических характеристик и является обязательным при проведении судебно-экспертной деятельности.

Статистическая обработка генетической информации и генерирование заключения о результатах анализа осуществляется в автоматизированном режиме при помощи разработанного нами компьютерного программного пакета. Это позволяет уменьшить время, необходимое для подготовки результатов заключения, а также свести к минимуму ошибки, возникающие в результате человеческого фактора.

Полученное заключение о результатах анализа проверяются заведующим лабораторией и затем высылаются заказчику в электронном варианте в формате PDF. Оригиналы заключений высылаются в течение следующего рабочего дня Почтой России заказным письмом. Генетическая информация и результаты анализов хранятся беcсрочно в базе данных.

Проводимые анализы:

В Медикал Геномикс ДНК анализы с целью установления родства проводятся по 12, 16, 17, 20 и 24 STR маркерам. Количество используемых маркеров зависит как от типа анализа, так и от желаемой точности. Следует помнить, что чем больше количество анализируемых ДНК маркеров, тем выше точность анализа.

В Медикал Геномикс ДНК анализы с целью установления родства проводятся по 12, 16, 17, 20 и 24 STR маркерам. Количество используемых маркеров зависит как от типа анализа, так и от желаемой точности. Следует помнить, что чем больше количество анализируемых ДНК маркеров, тем выше точность анализа.

1. Анализ по 12 STR маркерам

• Анализ X-хромосомы

2. Анализ по 16, 20 и 24 STR маркерам

• Установление отцовства
• Установление материнства
• Близнецовый тест
• Сиблинговый тест
• Авункулярный тест
• Дедушка/бабушка – внук/внучка

3. Анализ по 17 STR маркерам

• Анализ Y-хромосомы
• Анализ митохондриальной ДНК (мтДНК) проводится путем секвенирования митохондриальных гипервариабельных участков HV1 и HV2

Краткое описание ДНК анализов:

1. Установление отцовства

ДНК тест на отцовство позволяет установить, может ли мужчина являться биологическим отцом конкретного ребенка или нет. Возможны два варианта результата анализа: (1) исключение отцовства и (2) неисключение отцовства. Вероятность при не исключении отцовства 99,9999% и выше (точность 100% при неисключении отцовства теоретически не достижима). Вероятность при исключении отцовства составляет 100%. Существует два типа анализов на отцовства - дуэт и трио. При дуэте анализируются биологические образцы ребёнка и предполагаемого отца. При трио – биологические образцы ребёнка, предполагаемого отца и биологической матери. Использование образца биологической матери значительно повышает точность анализа.

2. Установление материнства

ДНК тест на материнство позволяет, установить может ли женщина являться биологической матерью конкретного ребенка или нет. Возможны два варианта результата анализа: (1)исключение материнства и (2) неисключение материнства. Вероятность при не исключении материнства

3. Близнецовый тест

Этот анализ позволяет установить, являются ли близнецы однояйцовыми или разнояйцовыми. Возможны два варианта результата анализа: (1) участники могут являться однояйцовыми близнецами и (2) участники являются разнояйцовыми близнецами. Точность анализа при подтверждении однояйцовости - 99.9999% и выше, при исключении – 100%. Для анализа необходимы образцы ДНК двух близнецов.

4. Сиблинговый тест

Этот тест позволяет определить, имеют ли два человека общими одного или обоих родителей (т.е. являются родными или сводными братьями, сестрами, или братом и сестрой). Существуют две разновидности сиблингового теста: полносиблиновый тест (когда участники точно знают о том, что у них один общий родитель и хотят установить, имеют ли они одного и того же второго родителя) и полусиблинговый тест (когда один родитель у участников анализа может быть общим, а второй точно нет). Возможны три варианта результата анализа: (1) участники могут являться полными (или полу-) сиблингами, (2) сиблинговое родства маловероятно (3) неопределенный результат (когда генетические данные не позволяют сделать выводы о возможности того или иного родства).

При вероятности родства 80% и выше выдается заключение о том, что сиблинговое родство возможно, при вероятности 10% и ниже выдается заключение о том, что родство маловероятно. При значениях вероятности родства в промежутке от 10% до 80% нельзя сказать о том, насколько вероятно то, или иное родство между людьми, поэтому выдается неопределенное заключение.

Для анализа необходимы образцы ДНК двух людей, которые предположительно являются родными, или сводными братьями, сестрами, или братом и сестрой

5. Авункулярный тест

Этот тест позволяет дать заключение о наличии родства между дядей (тетей) и предполагаемым племянником (племянницей). Возможны три варианта результата анализа: (1) родство вероятно, (2) родства маловероятно (3) неопределенный результат (когда генетические данные не позволяют сделать выводы о возможности того, или иного родства).

При вероятности родства 80% и выше выдается заключение о том, что авункулярное родство возможно, при вероятности 10% и ниже выдается заключение о том, что родство маловероятно. При значениях вероятности родства в промежутке от 10% до 80% нельзя сказать о том, насколько вероятно то или иное родство между людьми, поэтому выдается неопределенное заключение.

Для анализа необходимы образцы ДНК двух людей, находящихся в предполагаемом родстве.

6. Дедушка/бабушка – внук/внучка

Этот тест позволяет дать заключение о наличии родства между дедушкой (или бабушкой) и предполагаемым внуком (или внучкой). Существует два типа анализов на такой вид родства - (1) внук (внучка) и бабушка (дедушка) и (2) внук (внучка), бабушка и дедушка. Использование образцов бабушки и дедушки значительно повышает точность анализа и в определенных случаях позволяет полностью исключить родство (что не возможно в случаях, когда для анализа предоставлен только образец бабушки, или дедушки). Возможны четыре варианта результата анализа: (1) родство вероятно, (2) родства маловероятно (3) неопределенный результат (когда генетические данные не позволяют сделать выводы о возможности того, или иного родства) и (4) родство полностью исключено (только для случаев, когда участвуют и бабушка и дедушка). При вероятности родства 80% и выше выдается заключение о том, что биологическое родство возможно, при вероятности 10% и ниже выдается заключение о том, что родство маловероятно. При значениях вероятности родства в промежутке от 10% до 80% нельзя сказать о том, насколько вероятно то, или иное родство между людьми, поэтому выдается неопределенное заключение.

Для анализа необходимы образцы ребенка и бабушки (дедушки), или же ребёнка, бабушки и дедушки.

7. Анализ Y-хромосомы

Этот тест позволяет определить насколько близко двое мужчин состоят в родстве по одной отцовской линии (т.е. дедушка, родные братья дедушки - отец, родные братья отца - сын, сыновья братьев отца). Заключение даётся на основании анализа Y-хромосомы, которая передаётся исключительно по мужской линии от отца к сыну. При помощи этого теста можно подтвердить или опровергнуть являются ли двое мужчин членами одной семьи (при условии того, что у них один предполагаемый мужской прародитель). Также этот анализ можно использовать для установления отцовства мальчиков при отсутствии ДНК отца, когда есть возможность исследовать образцы дедушки по отцовской линии или родного брата отца. Для анализа необходимы образцы ДНК двух мужчин, которые предположительно могут принадлежать одной и той же мужской линии.

8. Анализ X-хромосомы

Этот тест имеет ограниченное применение, но иногда позволяет установить родственные отношения тогда, когда другие виды анализов дают неопределенный результат. Он пригоден только в случаях, когда ребёнок девочка (девочки получают X-хромосому от отца), предполагаемый отец не доступен для анализа, но есть его биологическая мать или сестра по отцу. В отличии от других тестов на родство (сиблинговый, авункулярный, бабушка-внучка) анализ Х-хромосомы позволяет исключить родство. При неисключении родства расчитывается вероятность и индекс родства. Для анализа необходимы образцы ребёнка (девочки) и ее родственника женского пола по отцовской линии. Точность исследования значительно возрастает при дополнительном участии биологической матери ребёнка. Когда исследование проводится с участием предполагаемой бабушки, и у нее есть еще один сын, кроме предполагаемого отца ребёнка, то точность анализа возрастает, если его образец будет предоставлен для анализа.

9. Анализ митохондриальной ДНК (мтДНК)

Этот тест позволяет определить насколько, близко два человека состоят в родстве по одной материнской линии. Заключение даётся на основании анализа митохондриальной ДНК (мтДНК), которая передаётся от матери всем её детям, но только девочки могут передать ее затем своим детям. При помощи анализа мтДНК можно определить, имеется ли родственная связь между двумя женщинами или мужчиной и женщиной, или же имеют ли двое людей общего материнского предка. Этот анализ можно так же использовать для определения материнства в случаях, когда образцы ДНК матери получить не возможно, но есть образцы брата (сестры) исследуемого по материнской линии, или же бабушки по материнской линии. Для анализа необходимы образцы ДНК двух людей, находящихся в предполагаемом родстве по одной и той же женской линии.

10. Генеалогические анализы

Этот вид анализа используется для установления этнического происхождения человека. Медикал Геномикс предоставляет два типа генеалогических анализов – анализ происхождения по мужской (отцовской) линии и анализ происхождения по женской (материнской) линии. Анализ происхождения по мужской линии проводится путем изучения Y-хромосомы, анализ происхождения по женской линии – путем изучения мтДНК. После получения генетических данных информация используется для установления гаплотипа Y-хромосомы (или митотипа мтДНК), по которому можно сказать к какой конкретно этнической группе принадлежит участник анализа, когда эта группа возникла, в каком географическом месте, а так же изучить распространение носителей этой гаплогруппы (или митотипа) в разных регионах земного шара.

11. Криминалистический анализ

ДНК идентификация является основным способом идентификации пятен биологического происхождения на месте преступления. При проведении анализа сравнивается ДНК профиль, полученный из биологического пятна с ДНК профилем подозреваемого (или подозреваемых). Если полученные профили идентичны, то рассчитывается вероятность случайного совпадения, которая является мерой доказательной ценности полученных улик. Как правило, криминалистический анализ проводят лаборатории СК Российской Федерации, а так же полицейские лаборатории. В Медикал Геномикс мы проводим криминалистический анализ биологических объектов в случаях, когда к нам обращаются следственные органы или сторона защиты.

Виды ДНК экспертиз:

В зависимости от преследуемой цели Медикал Геномикс проводит три вида экспертиз: (1) информационную экспертизу, (2) досудебную экспертизу и (3) судебную экспертизу. Важно помнить, что процедура лабораторного анализа при проведении этих экспертиз ни чем не отличается друг от друга. Разница состоит только в том, идентифицированы ли участники анализа или нет, и проводится ли экспертиза по постановлению суда или нет.

1. Информационная экспертиза

Информационный тест проводится по собственному желанию клиента для получений личной информации о родстве, и клиент не планирует использовать полученные результаты анализа в суде в качестве доказательств. Клиент вправе указать как свои настоящие данные, так и оформить заказ на вымышленное имя или анонимно. Так как участники анализа не идентифицируются и образцы ДНК берутся без соблюдений установленной юридической процедуры для предоставления результатов ДНК анализа в судебные инстанции, результаты проведенных анализов могут не иметь доказательной силы при судебном разбирательстве. Результаты ДНК анализа даются только исключительно для личной информации заказчика. Забор биологических образцов может проводится как в Вашей организации, так и заказчиком в домашних условиях. По окончанию анализа клиенту выдается Акт заключения о биологическом родстве. Срок выполнения информационной экспертизы – 2-3 рабочих дня.

2. Досудебная экспертиза

Если клиент хочет провести ДНК экспертизу по собственной инициативе, но при этом предполагает в дальнейшем использовать результаты анализа в суде в качестве доказательства, то в этом случае проводится Досудебная экспертиза. При проведении этого вида экспертизы забор биоматериала должен проводиться исключительно сотрудниками Вашей компании, и все участники анализа должны быть идентифицированы соответствующим образом. По окончанию анализа клиенту выдается Заключение специалиста. Срок выполнения досудебной экспертизы – 4-5 рабочих дней.

3. Судебная экспертиза

Судебная экспертиза назначается только по постановлению суда. Для проведения этого вида экспертизы Вашей организации может быть необходимо предоставить первоначальный пакет документов в суд для получения направления в лабораторию компании Медикал Геномикс. В пакет предоставляемых документов входит:

• Информационное письмо для суда от компании Меликал Геномикс
• Копии лицензий, сертификатов, а также основная информация о лаборатории.
• Копии документов, подтверждающие квалификацию эксперта.

Место забора образцов определяется, или согласовывается с судом. По решению суда забор биоматериала может осуществляться как в здании суда, так и в Вашем помещении. При проведении этого вида экспертизы забор биоматериала должен проводиться исключительно сотрудниками Вашей компании с предварительной идентификацией всех участников анализа. По окончанию анализа выдается Заключение эксперта, которое направляется Медикал Геномикс непосредственно в суд.